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菌种的培养条件以及保存方法介绍

作者:乐诊生物技术发布时间:2020-08-05 08:27浏览量:
  菌种的存活条件比较特殊,在培养菌种的时候需要按照一定的要求进行培养,保证菌种有一个正常的存活条件。同时也要对菌种进行合理的保存。那么你知道菌种的培养条件以及保存方法介有哪些吗?下面小编为大家介绍一下,一起来看看吧,看完你就明白了。

  菌种的培养条件有哪些?

 
  1、培养条件和菌龄实践证明,采用更适培养基和更适保藏温度进行保藏,可提高微生物的存活率,延长菌种保藏期。
 
  研究表明,处于稳定期的细胞或成熟的孢子对不良环境具有较强的抗性,因而,保藏非芽胞细菌和酵母菌,应采用对数末期或稳定初期的细胞。
 
  2、菌种悬液的浓度为了保证菌种保藏期间具有一定的存活细胞,往往将保藏微生物的细胞浓度增大。
 
  一般要求细菌细胞和放线菌孢子的浓度108/ml,酵母菌细胞和霉菌孢子的浓度>107/ml.
 
  3、保护剂采用液氮超低温冷冻、真空干燥和真空冷冻干燥保藏菌种,保护剂的选择是提高微生物冷冻或干燥存活率,延长菌种保藏期的关键因素。
 
  保护剂分为低分子保护剂(低聚糖类、醇类、缓冲盐类、氨基酸和维生素类)和大分子保护剂(蛋白质和多肽类、多糖类)。
 
  4、冻结速度在液氮法和冻干法保藏菌种的过程中,冻结速度是影响微生物存活率的重要因素。
 
  研究表明,真核微生物菌种适宜慢速冻结,而原核微生物菌种经慢速冻结和快速冻结后,细胞存活率差异不显着。
 
  5、保藏条件根据菌种保藏的目的和原理,尽量采取低温、干燥、避光和真空密封等综合技术措施和条件保藏菌种,以利于菌种保藏期的延长。
 
  6、恢复培养处于液氮冷冻状态的菌种恢复培养时,通常采用38℃--40℃快速升温解冻,因为慢速升温解冻有可能出现胞内再结冰,造成胞内冰晶增大而伤害细胞。

  菌种保存的方法有哪些?

 
  1、斜面低温保藏法
 
  将菌种接种在适宜的斜面培养基上,待菌种生长完全后,置于4℃左右的冰箱中保藏,每隔一定时间(保藏期)再转接至新的斜面培养基上,生长后继续保藏,如此连续不断。
 
  此法广泛适用于细菌、放线菌、酵母菌和霉菌等大多数微生物菌种的短期保藏及不宜用冷冻干燥保藏的菌种。
 
  2、石蜡油封藏法
 
  此法是在无菌条件下,将灭过菌并已蒸发掉水分的液体石蜡倒入培养成熟的菌种斜面(或半固体穿刺培养物)上,石蜡油层高出斜面顶端lcm,使培养物与空气隔绝。
 
  加胶塞并用固体石蜡封口后,垂直放在室温或4℃冰箱内保藏。使用的液体石蜡要求优质无毒,化学纯规格,其灭菌条件是:150~170℃烘箱内灭菌lh.
 
  3、砂土管保藏法
 
  这是一种常用的长期保藏菌种的方法,适用于产孢子的放线菌、霉菌及形成芽孢的细菌,对于一些对干燥敏感的细菌如奈氏球菌、弧菌和假单胞杆菌及酵母则不适用。
 
  其制作方法是,先将砂与土分别洗净、烘干、过筛,按砂与土的比例为(1~2):1混匀,分装于小试管中,砂土的高度约1cm,以121℃蒸汽灭菌1~1.5h,间歇灭菌3次。
 
  4、麸皮保藏法
 
  麸皮保藏法亦称曲法保藏。即以麸皮作载体,吸附接入的孢子,然后在低温干燥条件下保存。
 
  其制作方法是按照不同菌种对水分要求的不同将麸皮与水以一定的比例1:(0.8~1.5)拌匀,装量为试管体积2/5,湿热灭菌后经冷却,接入新鲜培养的菌种,适温培养至孢子长成。
 
  以上就是小编为大家介绍的菌种的培养条件以及保存方法介绍,大家可以去了解一下,如果有问题的话可以联系我们公司。