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实验 马丁氏培养基的制备

作者:乐诊生物技术发布时间:2020-07-20 18:26浏览量:
  一、目的要求
 
  通过对分离真菌用的马丁氏(Martin)培养基配制,掌握对选择培养基的配制方法,并明确选择的原理。
 
  二、基本原理
 
  马丁氏培养基是一种用来分离真菌的选择性培养基。此培养基是由葡萄糖、蛋白胨、KH2PO4、MgSO4•7H2O、孟加拉红(玫瑰红,Rose Bengal)和链霉素等组成。其中葡萄糖主要作为碳源,蛋白胨主要作为氮源,KH2PO4和MgSO4•7H2O作为无机盐,为微生物提供钾、磷和镁离子。而孟加拉红和链霉素主要是细菌和放线菌的抑制剂,对真菌无抑制作用,因而真菌在这种培养基上可以得到优势生长,从而达到分离真菌的目的。
 
  马丁氏培养基配方如下:
 
  KH2PO4 1g
 
  MgSO4•7H2O 0.5g
 
  蛋白胨5g
 
  葡萄糖10g
 
  琼脂15—20g
 
  水1000ml
 
  pH自然
 
  此培养液1000ml加1%孟加拉红水溶液3.3ml。临用时每100ml培养基中加1%链霉素液0.3ml。
 
  三、器材
 
  KH2PO4,MgSO4•7H2O,蛋白胨,葡萄糖,琼脂,孟加拉红,链霉素;
 
  试管,三角烧瓶,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅等。
 
  四、操作步骤
 
  1.称量和溶化
 
  按培养基配方,准确称取各成分,并将各成分依次溶化在少于所需要的水量中。待各成分完全溶化后,补足水分到所需体积。再将孟加拉红配成1%的溶液,在1000ml培养液中加入1%的孟加拉红溶液3.3ml,混匀后,加入琼脂加热溶化(方法同实验十九)。
 
  2.分装、加塞、包扎、灭菌,无菌检查与实验十九相同。
 
  3.链霉素的加入
 
  由于链霉素受热容易分解,所以临用时,将培养基溶化后待温度降至45℃左右时才能加入。可先将链霉素配成1%的溶液,在100ml培养基中加1%链霉素液0.3ml,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
 
  五、实验报告
 
  思考题
 
  (1)什么是选择培养基?它在微生物学工作中有何重要性?
 
  (2)培养细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的最适pH值各为多少?